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當前位置:首頁技術文章mirusbio MIR 2225說明書

mirusbio MIR 2225說明書

更新時間:2020-03-11點擊次數:2509

Mirus Bio,我們對基因組進行編程的作用是為科學家提供交鑰匙工具,可以隨意添加,刪除或修改任何基因。我們通過任何傳遞方法的支持來完成此任務,該方法能夠將任何核酸傳遞到任何細胞類型中。無論是需要高效病毒滴度,還是需要有效敲除靶基因,還是需要有效的低毒性解決方案,我們用于分子和細胞生物學應用的遞送系統都可以為研究人員提供基因組控制。

轉染試劑

反式 IT®轉染試劑被設計,測試和在Madison,WI生產的。我們幾乎可以在任何應用中使用多種試劑支持多種轉染方法。我們的試劑非常適合將多種類型的核酸遞送至真核細胞,包括:DNA,siRNA,miRNA,mRNA,病毒RNA,CRISPR / Cas9組分和寡核苷酸。我們所有的試劑都是由我們的轉染專家團隊生產的,可提供高效率的遞送,低細胞毒性并確保為您的實驗提供結果。

我們的轉染產品可為難以轉染和常見細胞類型提供解決方案,從而在許多應用中促進有效的工作流程和一致的實驗結果。無論是需要高效病毒滴度,有效敲除靶基因還是有效的低毒解決方案,我們用于分子和細胞生物學應用的遞送系統都可為研究人員提供基因組控制。

mirusbio MIR 2225說明書

 IT®-mRNA的轉染試劑盒

用于大RNA和CRISPR指導RNA的高效,低毒性轉染試劑

 

選擇尺寸:

MIR 22250.4毫升MIR 22501毫升MIR 22555 x 1毫升MIR 225610 x 1毫升

選擇的目錄號:MIR 2225

每個試劑盒與所提供的反式 IT®體mRNA轉染試劑和mRNA的升壓試劑

  • 低細胞毒性 – 保持細胞密度并減少實驗偏差
  • 高效傳遞 – 在大量細胞中實現RNA傳遞以確保實驗成功
  • 血清兼容 – 在血清存在下進行轉染,從而無需更換培養基并保持細胞健康
  • 提供各種大小的RNA – 非常適合特殊應用,例如病毒生產,蛋白質表達和CRISPR基因組編輯

 IT®體mRNA(1:1:1)

RNAiMAX(4:1)

Stemfect™(2:1)

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每日筆譯

 

附加信息

新! 假性尿苷和5-甲基胞嘧啶修飾的Messenger RNA的轉染,用于iPS細胞重編程(PDF) 和GaLa熒光素酶mRNA的體外轉錄,然后進行HeLa細胞轉染。Jani,B.,Fuchs,RJ Vis。經驗 (61),e3702。

 IT®體mRNA用于干細胞的應用
 IT®體mRNA為CRISPR / Cas9基因組編輯
 IT®體mRNA的高滴度的病毒的生產
反式 IT®體mRNA的比較數據,以電穿孔和TransMessenger®試劑
的細胞系在Mirus公司成功轉染利用 IT®-mRNA的轉染試劑盒(PDF)

數字和數據

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用TransIT-mRNA轉染試劑盒遞送Cas9 mRNA和CRISPR指導RNA

使用Cas9 mRNA +指導RNA寡核苷酸進行高效的基因組編輯。HEK293T / 17,和U2OS細胞NHDF共轉染用0.5μg的Cas9編碼mRNA,的5-MeC,ψ(TriLink是生物技術)和PPIB的25nM的靶向使用2-部分gRNA(Dharmacon公司)反式 IT®體mRNA轉染試劑盒(0.5微升/孔的mRNA試劑和Boost(Mirus Bio)的24孔板。T7E1錯配檢測分析用于測量轉染后48小時的切割效率。

 

TransIT-mRNA轉染試劑盒連續轉染14次后的高效低毒轉染

高效低毒轉14個之后連續用轉染 IT®-mRNA的轉染試劑盒。使用Trans在相同的BJ成纖維細胞群中進行每日重復轉染IT®-mRNA轉染試劑盒,Lipofectamine®RNAiMAX(生命技術公司)和Stemfect™RNA轉染試劑盒(Stemgent)-帶有加帽的聚腺苷酸EGFP mRNA,并結合了偽尿苷和5mC修飾的堿基(Trilink Biotechnologies,Inc.)。測試了多種試劑與RNA的比率,并給出了比率。使用指示的試劑與RNA的比例在12孔板中進行轉染,以遞送1 µg RNA。轉染后每天在同一視野中拍攝GFP和相襯圖像。連續14次每日轉染后,在Guava®easyCyte™5HT上通過流式細胞儀測量轉染效率(藍色條形)。使用在流式細胞術期間測量的細胞計數來確定細胞活力(黑線灰色條)。誤差棒代表一式三份孔的標準偏差。

 

TransIT-mRNA轉染試劑盒將GFP mRNA轉染到DC 2.4樹突狀細胞中

 IT®-mRNA的轉染試劑盒Transfects GFP表達成DC 2.4樹突狀細胞。使用反式 IT®體mRNA轉染試劑盒,DC 2.4細胞用(A)0.5微克,(B)1微克和(C)2.5微克加蓋并聚腺苷酸化的mRNA編碼GFP的與1μl轉染IT®體mRNA試劑和1微升。將細胞以100,000個細胞/孔在24孔板中接種過夜。轉染后10小時拍攝圖像。

數據由杜克大學的Kyle Phua(研究員:Kam W. Leong)提供

 

通過TransIT-mRNA轉染試劑盒轉染的mRNA表達多種樹突細胞類型的GFP

多個樹突狀細胞類型表達綠色熒光蛋白的mRNA轉染通過 IT®-mRNA的轉染試劑盒。鼠原代骨髓來源的樹突細胞(BMDC)和鼠樹突細胞類型(JAWSII和DC 2.4)轉染用1μg的封蓋并使用polyadenlyated的mRNA編碼GFP 橫貫 IT®體mRNA試劑:升壓:1的mRNA:1比例:1(µl:µl:µg)。將主要的BMDC,JAWSII和DC 2.4接種到24孔板中過夜(80,000個細胞/孔)。轉染后8小時,通過流式細胞術測定細胞。誤差棒代表至少3個單獨實驗的標準偏差。

數據由杜克大學的Kyle Phua(研究員:Kam W. Leong)提供

 

使用TransIT-mRNA轉染試劑盒遞送熒光素酶mRNA后高水平表達熒光素酶

使用熒光素酶基因的傳遞后高層次熒光素酶表達 IT®-mRNA的轉染試劑盒。使用Trans -mRNA轉染試劑盒,用加帽的多聚腺苷酸化的編碼熒光素酶的mRNA轉染12孔板中的細胞。轉染后約18小時,收獲細胞并確定每孔的總螢光素酶活性。

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TransIT-mRNA轉染試劑盒可將lacZ mRNA有效地提供給CHO-K1細胞

 IT®-mRNA的轉染試劑盒可有效提供lacZ的mRNA中的CHO-K1細胞。使用反式 IT®體mRNA轉染試劑盒,CHO-K1細胞被模擬轉染的(A)或與加蓋并多聚腺苷酸化的lacZ編碼mRNA(B)轉染的。轉染后約18小時,使用Mirus Bio的Beta-gal染色試劑盒對細胞進行染色,以鑒定lacZ轉染的細胞。

資源資源

新! HeLa細胞轉染高斯熒光素酶mRNA的體外 轉錄和上限。Jani,B.,Fuchs,RJ Vis。經驗 (61),e3702。
海報:病毒RNA基因組的高效傳遞(PDF)
海報:優化CRISPR / Cas9介導的哺乳動物細胞工程的DNA,RNA和RNP傳遞方法的優化(PDF)
文章:選擇的RNA轉染試劑并與電穿孔進行比較病毒RNA的傳遞

技術指標

儲存條件:
所有配置:在4°C下存儲

產品保證:
所有配置: 1年

 

 

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